■ 导读
杨隆兵等报道了具有抗真菌感染病原体白念珠菌活性的抗菌肽AMP-17的作用靶点。结果表明,XOG1和SRR1基因可能是AMP-17的作用靶点,这为新型多肽类抗真菌药物的研发和抗菌机制研究提供了依据。
标题
抗菌肽AMP-17抗白念珠菌作用靶点鉴定
作者
杨隆兵,田竺青,周罗雄,孙朝琴,黄明娇,田淳仁,彭建,国果
引用
杨隆兵, 田竺青, 周罗雄, 孙朝琴, 黄明娇, 田淳仁, 彭建, 国果. 抗菌肽AMP-17抗白念珠菌作用靶点鉴定[J]. 生物工程学报, 2023, 39(1): 304-317.
摘要:白念珠菌(Candida albicans)是侵袭性真菌感染的主要致病性病原体。抗菌肽AMP-17有较强的抗念珠菌活性,经AMP-17作用白念珠菌后的蛋白组学结果显示,细胞壁(XOG1)和氧化应激(SRR1)蛋白基因表达差异显著,提示AMP-17可能通过影响XOG1和SRR1基因发挥其抗白念珠菌作用。为进一步探究XOG1和SRR1基因是否为AMP-17的作用靶点,本研究利用规律成簇间隔短回文重复序列相关蛋白9 (clustered regulatory interspaced short palindromic repeats-associated protein 9, CRISPR/Cas9)系统构建了白念珠菌xog1Δ/Δ和srr1Δ/Δ缺失菌;表型观察结果发现除XOG1基因缺失可影响白念珠菌的体外应激和菌丝形成,2个基因缺失对白念珠菌生长繁殖和生物膜形成无明显影响;药敏实验分析显示AMP-17对xog1Δ/Δ和srr1Δ/Δ缺失菌的MIC80值从野生菌的8 μg/mL增至16 μg/mL,而对srr1Δ/Δ::srr1回补菌的MIC80值降至野生菌水平。此外,AMP-17抑制2株缺失菌生物膜形成的能力均较野生菌明显降低,表明缺失菌在酵母态及生物膜形成过程中对AMP-17的敏感性均降低,提示XOG1和SRR1基因可能是AMP-17发挥抗白念珠菌的潜在靶点。本研究结果为进一步探讨新型肽类抗真菌药物的抗菌机制提供了一定的实验依据和基础。
图1 PCR验证XOG1、SRR1基因敲除菌株和SRR1基因回补菌株
图2 基因缺失菌的时间-生长曲线
图3 基因缺失对白念珠菌菌丝形成的影响
图4 缺失菌对抗真菌药物的体外应激
图5 AMP-17对基因缺失菌生物膜的影响
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