法国生物制药公司 Cellectis 近日在自然出版集团旗下刊物《Scientific Reports》上发表论文，报道了该公司开发的 CubiCAR 的详情。CubiCAR 是种新型嵌合抗原受体(CAR)，携带了用于纯化、检测和消耗 CAR- T 细胞的多功能标签。这些新增功能有望简化 CAR- T 细胞的制造过程，提高在临床环境中追踪和消耗 CAR- T 细胞的有效性。

CAR- T 疗法是近年出现和迅速发展的癌症疗法。CAR- T 中的 CAR 是指工程化的嵌合抗原受体(Chimeric Antigen Receptor)，由一个来自免疫球蛋白分子或 T 细胞受体的抗原结合结构域和介导细胞内信号传导域融合，从而激活和增强 T 细胞的功能和持久性。CAR-T 治疗首先要从患者体内分离 T 细胞，在体外将工程化的 CAR 传送到 T 细胞中，产生抗原特异性的 T 细胞，让其能识别和杀灭癌细胞，经由体外扩增后再次注入患者体内，以此达到消灭癌细胞的效果。理论上，CAR- T 可以达到一劳永逸的治愈效果。而且，CAR- T 疗法能针对的不仅仅是癌症。与生理存在的抗原受体相比，CAR 可被设计来识别蛋白质、碳水化合物糖脂以及 HLA- 肽复合物等等，所以在将来还有潜力治疗以 T 细胞为基础的其他疾病，比如自身免疫性疾病和艾滋病等等，应用前景极为广阔。

虽然 CAR- T 疗法前景广阔，但却受到其生产的复杂性和与细胞活性相关的不良事件的挑战，比如细胞因子风暴(CRS)等。因此，开发能有效调控 CAR- T 的药物或疗法是该领域的一个研究重点。有许多公司在开发表达在细胞表面的 CAR- T 安全开关，相比之下，Cellectis 的产品则是把安全开关纳入 CAR 本身。

这次发表的论文中描述的 CubiCAR 是一种三功能 CAR 构建体，可使用 FDA 批准的抗体利妥昔单抗(Rituximab)实现 CAR- T 细胞检测，纯化和消耗。这种新颖构建体有望简化 CAR- T 细胞的生产，改善对 CAR- T 细胞的追踪，并且提高其安全性:以前通过抗体介导的安全开关常常需要数日才能起效，而 Cellectis 的体外实验显示，使用临床剂量的利妥昔单抗后，只需 15 分钟就能消耗绝大部分的 CAR- T 细胞。如能在人体实验中获得成功，那么这种构建有望降低由 CAR- T 造成的不良事件影响。

CubiCAR 构建体的组成(图片来源:参考资料 [1])

在本研究中，研究人员将 CD20 模拟表位(mimotopes)和 CD34 表位纳入 CAR- T 细胞的 CAR 构建体中，CAR- T 细胞针对的是肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族成员 17(TNFRSF17，CD269)，亦称 B - 细胞成熟抗原(BCMA)，它在大部分多发性骨髓瘤(MM)患者的恶性浆细胞表面都表达，也出现在正常浆细胞上和特定的成熟 B 细胞上，但其他组织不会表达这种蛋白。CubiCAR 采取这种构建，期望 CD20 模拟表位让细胞能被抗 CD20 的利妥昔单抗消耗，而 CD34 表位能在制造 CAR- T 过程中起作用，可以利用抗 CD34 的单克隆抗体对产品进行细胞检测和纯化，从而创建更多的嵌合细胞产物。

结果显示，在 BCMA 阳性的多发性骨髓瘤小鼠模型中，CubiCAR 细胞和 CAR- T 细胞均减少了在血液，骨髓和脾脏中的 MM 细胞。在用 CubiCAR- T 细胞治疗的小鼠中，注射利妥昔单抗减少了 CubiCAR- T 细胞，并促进了 MM 细胞的增殖，而未修饰的 CAR- T 细胞不受利妥昔单抗的影响，这说明 CubiCAR 细胞能有效受利妥昔单抗的调控。

“这项技术的强大和新颖之处在于将多种功能整合到一个独特的 CAR 分子中。为了确定最佳的 CAR 结构，我们选择了 15 种不同的 CAR 构建体，并评估了能够消耗 T 细胞并根治肿瘤的构建体，”Cellectis 创新团队负责人 Julien Valton 博士说: “这个新构建体的开发是与在 Allogene 的同事合作而成的。”

Cellectis 首席科学官 Philippe Duchateau 博士 (图片来源:Cellectis 官网)

“CubiCAR 的面世，代表了 CAR- T 疗法在各种癌症治疗方面向前迈出了重要一步，”Cellectis 首席科学官 Philippe Duchateau 博士补充说:“CubiCAR 构建体不仅集成了紧凑的安全开关，可快速高效地消耗 CAR- T 细胞，而且还兼容针对不同目标设计的 scFvs，因而具备独特的潜力，可使 CAR- T 细胞免疫疗法更安全。”

我们祝贺 Cellectis 取得的成果，希望这个发明能为多种癌症患者带来更安全，更有效的疗法。

参考资料

[1]A Versatile Safeguard for Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapies

[2]CubiCAR, a Next Generation CAR, Allows for the Purification, Detection and Efficient Elimination of CAR T-Cells

本文转载自:药明康德