今天要介绍的是Cytoskeleton一款纯度>99%的Tubulin聚合检测试剂盒。该试剂盒含有可用纯度的猪神经微管蛋白(>99%纯度,Cat.#T240)。HTS微管蛋白(Cat.#BK004P)也提供了相同类型的检测,可作为BK006P的经济、但灵敏度稍低的替代品。HTS微管蛋白(Cat.#HTS03)纯度>97%。Cytoskeleton还有一种小型化的基于荧光的微管蛋白聚合分析(Cat.#BK011P),使其成为高通量筛选的理想选择。
Cytoskeleton 专注于研究生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒。包括药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰(PTM)、细胞骨架研究相关的系列试剂盒,尤其以细胞骨架相关研究见长,既能满足于样品较少的科学研究,也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。此外,还有微管蛋白,肌动蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等现有 药物筛选服务。
Cytoskeleton/派克生物 Tubulin聚合检测试剂盒结果
该图显示了一条标准聚合曲线(控制曲线),其中含有100µl体积的3 mg/ml微管蛋白,置于pH值为7.0、0.5 mM EGTA、2 mM MgCl2、1 mM GTP和10%甘油的80 mM管道中。聚合通过在37℃下孵育开始,然后在340nm处读取吸收读数。在这些条件下,聚合Vmax在10µM紫杉醇存在下增加4倍,在10µM诺可达唑存在下减少5.5倍。
Cytoskeleton/派克生物 Tubulin聚合检测试剂盒相关研究:
1、Cytoskeleton丨Tubulin聚合检测(荧光法-96assays 猪脑 tubulin)试剂盒
本试验是一种经济的一步程序,用于确定药物或蛋白质对微管蛋白聚合的影响。这是对Bonne,D.等人(1)最初描述的分析的改编。聚合后,由于聚合发生时荧光报告物并入微管,因此荧光增强。标准分析使用神经微管蛋白(Cat.#T240),它生成一条代表微管形成三个阶段的聚合曲线;即成核、生长和稳态平衡。其他微管蛋白,如HeLa细胞微管蛋白(Cat.#H001)也可用于本试验。每次分析的低容量为50。
2、Cytoskeleton丨Actin聚合生化试剂盒
肌动蛋白聚合生物化学试剂盒™ 基于聚合过程中芘结合肌动蛋白的荧光增强。当芘G-肌动蛋白(单体)形成芘F-肌动蛋白时发生的增强荧光可在荧光计中测量,以跟踪随时间的聚合。此外,通过使用预成型的芘F-肌动蛋白,可以进行解聚。
3、Cytoskeleton丨微管蛋白 (HiLyte 488 染色标记;猪,显微注射)
猪脑微管蛋白(纯度>99%)已被修饰为含有共价连接的HiLyte-Fluor™ 488 随机表面赖氨酸。HiLyte氟的活化酯™ 488用于标记蛋白质。通过蛋白质和染料浓度的光谱测量确定标记化学计量(当蛋白质结合时,染料消光系数为76000m-1cm-1)。zui终标记化学计量学为每微管蛋白异二聚体1-2个染料。
4、Cytoskeleton丨Microtubule / Tubulin 体内分析试剂盒
测定细胞群中微管含量与游离微管蛋白含量的最重复和准确的方法是使用微管和游离微管蛋白细胞组分的westernblot定量。一般的方法是在微管稳定缓冲液中使细胞均质,然后离心分离微管和游离微管蛋白池。然后用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离各组分,用免疫印迹法定量微管蛋白。最后的结果给出了最准确的方法来确定微管蛋白与细胞骨架中的微管蛋白的比例,以及在细胞溶胶中发现的游离微管蛋白的比例。
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