酶联免疫吸附测定

enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA

定义：将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的高灵敏度分析技术。基本设计是用酶（如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等）标记抗体，该酶标抗体可与待测的抗原或抗体抗原复合体等免疫吸附物结合，酶所催化的呈色反应可以间接反映抗原的量。根据该基本原理已发展出有各种用途的多种分析方案。

学科：生物化学与分子生物学_方法与技术

相关名词：标记免疫分析 抗原 抗体

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【延伸阅读】

酶联免疫吸附测定是一种常用的标记免疫分析技术，常被用来定量地检测物质，包括抗原、蛋白质、糖蛋白、激素等。进行酶联免疫吸附测定需要准备三种试剂：固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体、酶作用的底物。酶联免疫吸附测定可分为三明治法、间接法、竞争法等。其中三明治法应用较多。

三明治法主要可分为以下步骤：首先针对所检测物质将一种可以与其特异性结合的抗体吸附到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。随后加入样品，使之与抗体结合，通过洗涤去除未结合抗体。随后加入酶联抗体，这种抗体既可以与待测物质特异性结合，又联结了一种特殊的酶，常见联结的酶有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AKP）。通过洗涤去除未结合的酶联抗体，加入显色液，酶可以催化显色液中无色的底物得到具有颜色的产物。最后通过酶标仪测定吸光度，得到样品中待测物质含量。

酶联免疫吸附测定在临床医学、食品分析、农牧渔业等领域有广泛的应用。在临床医学上，酶联免疫吸附测定可用于测定患者血清中药物治疗的生物标记物或细胞因子水平，也可用于毒性、病毒感染的诊断检测；在食品分析方面，其可用于食品中农药残留的检测及肉类制品的品质检测；在农牧渔业方面，酶联免疫吸附测定可用于已接种动物的口蹄疫检测。

（延伸阅读作者：东北师范大学生命科学学院 程海荣教授）